elisa測(cè)定試劑盒基本原理及注意事項(xiàng)
⒈ 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)別離以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照操控試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證試驗(yàn)效果的性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反響,可選用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
⒉ 在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的挑選是很首要的,其間包含:
⑴ 固相載體的挑選:很多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其辦法可所以凹孔平板、試管、珠粒等。當(dāng)時(shí)常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體,在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選:用等量抗原包被,在同一試驗(yàn)條件下進(jìn)行反響,查詢其顯色反響是不是均一性,據(jù)此判明其吸附功能是不是超卓。
⑵ 包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體外表時(shí),央求純度要好,吸附時(shí)一般央求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃18~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定:即用不一樣的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相一同,查詢陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。挑選OD值z(mì)ui大而蛋白量zui少的濃度。對(duì)于大都蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)一般為1~10μg/ml。
⑶ ELISA試劑盒酶符號(hào)抗體作業(yè)濃度的挑選:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶符號(hào)抗體部份)。然后再固定其它條件或選用“方陣法"(包被物、待檢樣品的參看品及酶符號(hào)抗體別離為不一樣的稀釋度)在正式試驗(yàn)系統(tǒng)里地滴定其作業(yè)濃度。
⑷ 酶的底物及供氫體的挑選:對(duì)供氫體的挑選央求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反響,而本身無(wú)色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌效果,應(yīng)留神防護(hù)。有條件者應(yīng)運(yùn)用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是當(dāng)時(shí)較為滿意的供氫體。底物效果一段時(shí)刻后,應(yīng)參加強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以間斷反響。一般底物效果時(shí)刻,以10-30分鐘為宜。底物運(yùn)用液有必要新鮮,尤其是H2O2在臨用前參加。①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體外表,并堅(jiān)持其免疫活性。
elisa測(cè)定試劑盒白細(xì)胞介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit
白細(xì)胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1α/IL-1F1 ELISA Kit
白細(xì)胞介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1α ELISA Kit
白細(xì)胞介素18(IL-18)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit
白細(xì)胞介素17(IL-17)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-17 ELISA Kit
白細(xì)胞介素16(IL-16)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-16 ELISA Kit
白細(xì)胞介素15(IL-15)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-15 ELISA Kit
白細(xì)胞介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-12/P70 ELISA Kit
白細(xì)胞介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-12/P40 ELISA Kit
白細(xì)胞介素11(IL-11)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-11 ELISA Kit
白細(xì)胞介素10(IL-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-10 ELISA Kit
白細(xì)胞分化抗原配體40(CD40/TNFRSF5)ELISA試劑盒 ,英文名: CD40/TNFRSF5 ELISA Kit
白細(xì)胞分化抗原CD40配體(CD40L/TNFSF5)ELISA試劑盒 ,英文名: CD40L/TNFSF5 ELISA Kit
白介素6受體(IL-6R)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-6R ELISA Kit
白介素20(IL-20)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-20 ELISA Kit
白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1RA ELISA Kit
白介素1β(IL-1B)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-1B ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)單核因子(MIG/CXCL9)ELISA試劑盒 ,英文名: MIG/CXCL9 ELISA Kit
γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIG/CXCL9)ELISA試劑盒 ,英文名: MIG/CXCL9 ELISA Kit
L選擇素(SELL)ELISA試劑盒 ,英文名: SELL ELISA Kit
G-CSF Receptor(CD114)ELISA試劑盒 ,英文名: CD114 ELISA Kit
E-鈣粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)ELISA試劑盒 ,英文名: E-Cadherin/CDH1/CD324 ELISA Kit
E-鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒 ,英文名: E-Cadherin ELISA Kit
CXC趨化因子配體1(CXCL1)ELISA試劑盒 ,英文名: CXCL1 ELISA Kit
CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒 ,英文名: FKN/CX3CL1 ELISA Kit
CD80分子(CD80/B7-1)ELISA試劑盒 ,英文名: CD80/B7-1 ELISA Kit
B細(xì)胞活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)ELISA試劑盒 ,英文名: BAFF/CD257/TNFSF13B ELISA Kit
10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒 ,英文名: IP-10/CXCL10 ELISA Kit
10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10)ELISA試劑盒 ,英文名: IP-10 ELISA Kit
左右決定因子1(LEFTY1)ELISA試劑盒 ,英文名: LEFTY1 ELISA Kit
組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA試劑盒 ,英文名: TGM2 ELISA Kit
組織因子通道抑制因子2(TFPI2)ELISA試劑盒 ,英文名: TFPI2 ELISA Kit
組織型纖溶酶原激活因子(tPA)ELISA試劑盒 ,英文名: tPA ELISA Kit
組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)ELISA試劑盒 ,英文名: LTBP2 ELISA Kit
組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP4 ELISA Kit
組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)ELISA試劑盒 ,英文名: TIMP3 ELISA Kitelisa測(cè)定試劑盒