亚洲一区二区,在线看日韩黄色,美女视频录像久久久,精品久久免费黑人

設(shè)為主頁 加入收藏 聯(lián)系我們

公司公告

更多公告>>
技術(shù)文章
當(dāng)前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > PCR擴(kuò)增后電泳后幾種條帶簡述
PCR擴(kuò)增后電泳后幾種條帶簡述
點(diǎn)擊次數(shù):6 更新時(shí)間:2025-07-17

PCR擴(kuò)增后一般進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳分析,電泳后一般有以下幾種條帶:

1、引物帶。

引物濃度過高或是擴(kuò)增效率不是特別高時(shí)都會(huì)有,一般不呈現(xiàn)為細(xì)帶,為發(fā)散狀;如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶和引物帶都很亮,可以考慮適當(dāng)降低引物量。

2、引物二聚體帶。

比引物跑得慢一點(diǎn),條帶清晰,但如果擴(kuò)增產(chǎn)物小于100bp時(shí),產(chǎn)物與引物二聚體就不好分別了,建議采用DNA聚丙烯酰胺電泳(不是蛋白質(zhì)的SDS聚丙烯酰胺電泳);如果引物二聚體在優(yōu)化復(fù)性溫度后仍然嚴(yán)重影響目的產(chǎn)物的擴(kuò)增,優(yōu)先考慮更換引物設(shè)計(jì)(因?yàn)橐锖铣傻某杀颈确磸?fù)優(yōu)化條件的成本低)

3、目的擴(kuò)增產(chǎn)物帶。

其大小與設(shè)計(jì)大小相同,條帶清晰。

4、非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶。

其大小與設(shè)計(jì)大小不相同,條帶清晰。一般考慮通過提高復(fù)性溫度來減少或消除(也可用溫度梯度功能來尋找合適的復(fù)性溫度,東勝龍811PCR儀就有此功能)。如果其片段大小比目的片段大較多,可以通過減少延伸時(shí)間來減少或消除(即不給它足夠的延伸時(shí)間)。還有一種非特異擴(kuò)增產(chǎn)物帶是來自于逆轉(zhuǎn)錄PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)的基因組DNA的污染,如果目的擴(kuò)增產(chǎn)物中有內(nèi)含子,擴(kuò)增產(chǎn)物很可能大于目的基因。這種條帶通過優(yōu)化復(fù)性溫度是不能消除的,可以在逆轉(zhuǎn)錄前用無RNA酶的DNA酶進(jìn)行樣本處理。

5、模板DNA帶。

模板濃度過高時(shí)可能出現(xiàn)。如果是基因組DNA為模板,條帶可能會(huì)很亂且較大。一般進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),模板濃度都不要太大,否則會(huì)產(chǎn)生一些比目的基因長一點(diǎn)的雜質(zhì)DNA(可能不成條帶,也看不到),這是由PCR擴(kuò)增原理造成的。


聯(lián)系人:王經(jīng)理
點(diǎn)擊這里給我發(fā)消息
電話:
86-021-57763112
手機(jī):
18917018169

智慧城市網(wǎng)

推薦收藏該企業(yè)網(wǎng)站